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Fig.Trajectory chart of water maze experiment
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Fig. Microinjection of Aβ1-40
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产品包装(模拟)
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产品包装(模拟)
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通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证
阿尔茨海默病(AD)大鼠模型
Rat Model for Alzheimer Disease (AD)
- 编号DSI707Ra01
- 物种Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
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- 规格 每例
- 价格 ¥ 1680
- 原型物种人
- 来源物理方法和药物
- 模式动物品系SPF级SD大鼠，健康，雄性，体重为250g-300g。
- 实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
- 实验周期4-6 weeks
- 建模方法模型建立：SD大鼠均采用1%戊巴比妥钠40μg/g腹腔内注射麻醉，麻醉后继而固定于脑立体定位仪上。按照大鼠脑立体定位图谱，以前囟为零起点，前囟后3.5 mm处为穿刺点，中线右侧旁开2mm，而后牙科钻钻开颅骨，采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm，即：(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm)，双侧海马CA1区缓慢匀速注射Aβ1-40各10 μg (1 μL)，留针5 min，退针后缝合伤口。造模后3d后，开始尾静脉注射，注射生理盐水，大鼠每只给药100μl/次/d，连续给药21d后，进行水迷宫行为学检测。
- 应用疾病模型用于阿尔兹海默症的药物研发
行为学检测：
所有组别，于给药后21d，进行Morris水迷宫试验，试验分为定位航行实验和空间探索实验。
1. 定位航行实验：大鼠连续接受5天的训练，每天4次，每次时间间隔30min，记录下大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间，即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果进入到最后统计。
2. 空间探索实验：实验的第6天，撤去平台，从距离平台的最远端入水后，将大鼠放入水中，记录下30s内大鼠的游泳轨迹，并观察分析大鼠在目标象限的停留时间，以及它的穿越平台的次数。
行为学结束后，将各组大鼠摘取全脑，冰上剥去小脑，将剩余部分左右对切，一半放入4%多聚甲醛中固定，用于病理学检测。另一半取海马用于PCR和蛋白检测。
1. 尼氏染色
海马组织固定后石蜡切片，进行尼氏染色，观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下，计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量，作统计分析。
2. 免疫荧光染色
免疫荧光染色，观察海马区Aβ1-40染色情况。荧光显微镜下，计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量，作统计分析。
3. TUNEL染色
海马组织进行TUNEL染色，观察神经元凋亡情况。荧学显微镜下，计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量，作统计分析。
1. RT-qPCR检测
收集海马组织，提取RNA，反转录cDNA，PCR检测caspase-3，Bcl-2和Bax的表达。
2. Western-blot检测
收集海马组织蛋白，检测active-caspase-3，Bcl-2和Bax的蛋白表达。
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显
